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lipo3000全新的轉(zhuǎn)染試劑
瀏覽次數(shù):18519發(fā)布日期:2015-09-10

lipo3000全新的轉(zhuǎn)染試劑

能轉(zhuǎn)染難處理細(xì)胞的通用型試劑:

  • zui高的效率—適用于各種難以轉(zhuǎn)染的以及常見的細(xì)胞類型
  • 溫和低毒—細(xì)胞活性更高
  • 功能多樣—適用于DNA、RNA和共轉(zhuǎn)染的試劑盒

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類型中具有廣泛的優(yōu)良性能

Lipofectamine? 3000試劑充分利用了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),實現(xiàn)了超高轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的試驗結(jié)果。其可在zui廣泛的難轉(zhuǎn)染和通用細(xì)胞類型(圖1)中獲得非凡的轉(zhuǎn)染效率,同時提升細(xì)胞存活率。



圖1. Lipofectamine? 3000試劑勝過了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉(zhuǎn)染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細(xì)胞系,并在轉(zhuǎn)染后48小時分析GFP表達(dá)情況。在所有五種細(xì)胞系中,Lipofectamine? 3000都表現(xiàn)出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP轉(zhuǎn)染效率。



圖2. Lipofectamine? 3000操作手冊在保持易用性的同時,還保持了優(yōu)異的性能和可靠性,適用于廣泛的細(xì)胞系類型。

下載Lipofectamine? 3000操作手冊 >

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溫和低毒

在開發(fā)Lipofectamine? 3000時,我們對轉(zhuǎn)染過程的四個步驟進(jìn)行了優(yōu)化,同時結(jié)合了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)。其所具有的超高轉(zhuǎn)染效率使得我們可以減少試劑劑量,降低處理細(xì)胞時的潛在毒性風(fēng)險。


圖3. 采用劑量的每種試劑,通過綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)載體,以96孔形式轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染后48小時,采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,以測定百分比形式的轉(zhuǎn)染效率以及GFP表達(dá)強(qiáng)度。相對于Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? LTX試劑,Lipofectamine? 3000試劑表現(xiàn)出了更高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)水平。

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增強(qiáng)您的癌癥研究工作

使用生物相關(guān)性的細(xì)胞系,可為您的研究課題提供相關(guān)性的答案。Lipofectamine? 3000試劑適用于zui廣泛的細(xì)胞譜系且兼具較高的轉(zhuǎn)染效率,使您可以非常靈活地在研究中應(yīng)用自己選擇的細(xì)胞。

表1. 在不同的細(xì)胞系中,Lipofectamine? 3000試劑獲得了比Lipofectamine? 2000試劑更高的轉(zhuǎn)染效率。

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  • 細(xì)胞系 #-C
  • 細(xì)胞系 D-J
  • 細(xì)胞系 K-P
  • 細(xì)胞系 R-Z
細(xì)胞類型Lipofectamine? 3000試劑轉(zhuǎn)染效率Lipofectamine? 3000相對于 Lipofectamine? 2000試劑蛋白表達(dá)水平提高倍數(shù)
3T34
4T12
A4312
A5493
ACHN2
bEnd.39
BJ3
BT-5494
C2C123
C65
Caco-22
Caki-14
CHO-K11
CHO-S1
COLO 2054
COS-74

轉(zhuǎn)染效率 (%): <30%     30-50%    51-79%    >80% 

Lipofectamine? 3000試劑與的Lipofectamine? 2000試劑相比,在多種組織來源的癌癥細(xì)胞中具有更高的轉(zhuǎn)染效率。在所選的癌癥細(xì)胞系中,使用Lipofectamine? 2000僅有25%被認(rèn)為易于轉(zhuǎn)染(>50%的轉(zhuǎn)染效率),而使用Lipofectamine? 3000卻有60%的細(xì)胞系是易于轉(zhuǎn)染的。



圖4. 采用Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? 3000試劑將表達(dá)GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至17種癌癥細(xì)胞系中,利用各試劑推薦的實驗方案,在24孔板中進(jìn)行轉(zhuǎn)染,每孔質(zhì)粒用量為0.5μg。轉(zhuǎn)染48小時后分析GFP表達(dá)情況。重復(fù)檢測3次,數(shù)據(jù)點顯示平均轉(zhuǎn)染效率 + 標(biāo)準(zhǔn)差。

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生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)

Lipofectamine? 3000優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保證了體細(xì)胞的重編程,無需電轉(zhuǎn)。

圖5. 結(jié)果來自于明場顯微鏡,(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)都表明在生成iPSC細(xì)胞群落時重編程成功了。使用堿性磷酸酶進(jìn)行末端染色。

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改善基因組編輯結(jié)果

開發(fā)Lipofectamine? 3000試劑,旨在突破輸送技術(shù)的界限,促進(jìn)生物相關(guān)系統(tǒng)內(nèi)的新技術(shù)發(fā)展,例如基因組編輯。通過這一新試劑,GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS細(xì)胞內(nèi)的AAVS1位點,同時表現(xiàn)出更佳的轉(zhuǎn)染效率、平均熒光強(qiáng)度和基因組切割效果。這些改進(jìn)之處有助于zui大限度減少繁重的下游工作,更便于進(jìn)行干細(xì)胞處理,增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因在細(xì)胞基因組中的位點特異性插入。

下載應(yīng)用說明 >



圖6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中的AAVS1位點。采用GeneArt?基因組切割檢測試劑盒分析切割效率。



圖7. 使用CRISPR載體時的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)。該載體含有OFP報告基因,并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染到(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中。柱狀圖所示為報告基因的表達(dá)。圖片所示為相應(yīng)細(xì)胞表達(dá)OFP的熒光圖。

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轉(zhuǎn)染干細(xì)胞

圖8. 使用Lipofectamine ? 3000轉(zhuǎn)染H9干細(xì)胞 (A)或iPSC (B)。

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*不必購買。此次*面向中國大陸境內(nèi)年滿21歲的生命科學(xué)專業(yè)人士。樣品申請必須于2014年6月30日之前或者樣品發(fā)放完畢之前提交給我們,以二者之中的較早者為準(zhǔn)。樣品規(guī)格為0.1 mL。每名顧客限領(lǐng)一份。醫(yī)護(hù)專業(yè)人士不得參與此次*活動。本次*不享受其它折扣或*。如遇法律或法規(guī),或公司/機(jī)構(gòu)政策禁止、許可或限制,本次活動作廢。可能會適用其他未注明的限制條件。

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資源

  • 應(yīng)用說明:
    改善基因組編輯結(jié)果[PDF, 3 MB]
    Lipofectamine? 3000 iPSCs的生成和轉(zhuǎn)染[PDF,6MB]
  • 海報:
    Lipofectamine? 3000 海報 [PDF, 370 KB]

 

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