DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒 分子生物試劑
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒
從動物血液和組織、細胞、酵母、細菌或者病毒中純化總DNA
為各種類型樣本提供標準化的純化方法
即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產量DNA
高品質DNA
經過優化的操作方法適合處理多種起始樣本
可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數樣本可直接用蛋白酶K消化處理，無需機械破碎，減少了手動操作時間。為特殊樣本提供優化的純化方法，獲得高重復性、高純度的DNA，用于生物研究、基因型分析和獸醫病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit，在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行。
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒
DNA產量。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit從100 µl全血中純化DNA。羊：從50 µl羊全血中純化DNA。使用超過50 µl的羊血時，DNA產量沒有明顯增加。雞：從5 µl雞全血中純化DNA。鳥類血液中含有核紅細胞，因此其DNA產量比哺乳動物的高。
DNeasy Mini和96實驗流程。
高效的16重PCR。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit從人類K562細胞中純化基因組DNA。使用QIAGEN Multiplex PCR Kit對圖示量的DNA和16對引物進行多重PCR，反應平行進行兩次。M: 100 bp ladder。
高品質DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit從圖示的動物樣本中純化DNA，并進行瓊脂糖凝膠電泳分析。對于每個樣本，都對0.5 µg未經過酶處理的DN（左側）、或1 µg經過EcoRI處理的DNA（右側）進行了分析。M: lambda-HindIII。
對馬進行基因分型。
從三批棕色馬的鬃毛中純化獲得DNA，并使用MSH和ASIP PCR對毛色基因型進行分析。[A] MSH PCR產物用TaqI酶處理。馬1和2確定為Ee雜合體，攜帶紅色毛色的隱性等位基因e。[B]對ASIP PCR產物分析得出，馬1和2為Aa雜合體，攜帶黑色毛色的隱性等位基因a。+：黑色馬Ee aa陽性對照。–陰性對照。M：標記物。
高通量純化。
使用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit從24個小鼠尾和24個大鼠尾樣本中純化DNA。在1%的瓊脂糖凝膠上進行DNA電泳分析。M: lambda-HindIII。
Real-time PCR。
Borrelia sp.是由蜱攜帶的病原體，可導致人類或其他哺乳動物患萊姆病。使用DNeasy Blood & Tissue Kit從蜱中純化DNA。在LightCycler儀器上使用artus Borrelia LC PCR Kit，通過real-time PCR檢測Borrelia DNA。陽性樣本曲線的最di處對應每次PCR反應5個拷貝DNA。
對豬進行基因分型。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit從豬耳刻樣本中純化DNA，然后使用Biotype AG公司的Animaltype Pig PCR Amplification Kit和QIAGEN HotStarTaq DNA Polymerase進行擴增。電泳圖顯示：12個多態性四核苷酸微衛星和一個性別鑒定標記物（SBH23）的遺傳指紋圖譜。
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優化的實驗方案可確保非標準樣本的高產量，如動物毛發和培養細胞、固定的組織，或者革蘭氏陽性和陰性細菌。獨te的在線實驗方案參考文庫，可從酵母、昆蟲、毛發和其他類型樣本中純化DNA。
| 樣本來源 | 樣本量 | DNA（µg） |
|---|---|---|
| 哺乳動物血液 | 100 µl | 3–6 |
| 鳥類血液 | 5 µl | 9–40 |
| HeLa細胞 | 2 x 106 | 15–25 |
| 肝臟 | 25 mg | 10–30 |
| 腦 | 25 mg | 15–30 |
| 腎臟 | 25 mg | 15–30 |
| 脾臟 | 10 mg | 5–30 |
| 小鼠尾 | 1.2 cm（尾部） | 10–25 |
| 大鼠尾 | 0.6 cm（尾部） | 20–40 |
| 豬耳 | 25 mg | 10–30 |
| 馬毛 | 10 根毛發 | 2–4 |
| 魚鰭 | 20 mg | 10–20 |
| 魚卵（鯖魚） | 10 mg | 5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程，包括在生命科學、獸醫學和基因分型研究應用中常見的動物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑，能在標準多重real-time PCR中進行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實驗結果，從轉基因小鼠的實驗室分析到家畜的育種項目和種系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地擴大常規的檢測應用的規模。
DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中，包括新鮮或冷凍的動物組織和細胞、血液或者細菌，快速純化總DNA（如，基因組、線粒體和病原體等）。
DNeasy膜整合了硅膠膜的結合特性，經簡單顯微離心技術或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環境中，DNA吸附在DNeasy膜上，可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設計的緩沖液條件，旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上，并且優化去除污染物和酶抑制劑。
純化過程不需要苯fen或氯仿抽提或乙醇沉淀，僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時處理多個樣本。對于高通量的應用，DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時處理96或192個樣本。
可靠的硅膠膜技術，利用便捷的離心柱或96孔板形式，確保了快速可重復的DNA純化，不再需要有機抽提和乙醇沉淀。樣本首先用蛋白酶K裂解。調整緩沖條件，以提供的DNA結合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中，DNA選擇性地結合到DNeasy膜上，污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個高效的洗滌步驟中被去除。然后，用水或緩沖液將DNA洗脫，待用。
DNeasy Mini離心柱預裝在收集管中，并且單獨封存，確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動進行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進行高通量處理。
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質DNA，可直接用于多種下游分析，包括：
生命科學研究
家畜育種
種系基因分型研究
獸醫病理分析研究
常規的應用檢測
特點 | 參數 |
| Applications | PCR, real-time PCR, genotyping |
| Elution volume | 100–200 µl |
| Format | 96-well plate, spin column |
| Main sample type | Blood, tissue |
| Processing | Manual |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | DNA |
| Sample amount | 100 µl/25 mg |
| Technology | Silica technology |
| Time per run or per prep | 20 minutes – 1 hour |
| Yield | 6 µg/30 µg |
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